姜黄素影响铁死亡途径缓解LPS诱导牛乳腺上皮细胞炎性反应的分析

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摘要:本研究旨在从铁死亡途径探究姜黄素(curcumin,Cur)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎性反应的影响。将处于对数生长期的MAC-T细胞按照试验要求随机分组并进行相应的处理,每组3个重复。采用 MTT 法测定不同浓度的LPS/Cur 对 MAC-T细胞存活率的影响;RT-PCR 法检测炎症相关基因( TNF-α 、IL–6.IL–1β.iNOS.CXCL 2AA.CCL 2) 与铁死亡相关基因 (PTGS2,SLC7A11,GPX4,FTH1,ACSL4) 的转录水平;BODIPY581/591C11染色检测细胞脂质过氧化水平;试剂盒检测细胞中MDA含量、LPO浓度、GSH含量、GSH/GSSG比值;Ferro-Orange染色和 Fe2+ 检测试剂盒测定细胞中 Fe2+ 含量;ELISA试剂盒检测细胞中TNF- ∇⋅α 、IL-6、IL-1β浓度;Westernblot检测GPX4、ACSL4、TNF- a 、IL-6、IL-1β蛋白的相对表达水平。(剩余16923字)

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