基于PINK1/Parkin通路探讨温阳解毒化瘀方含药血浆对肝细胞损伤的影响

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[摘要]目的 基于PTEN诱导激酶1（PINK1）/E3泛素连接酶（Parkin）通路探讨温阳解毒化瘀方含药血浆对肝细胞损伤的影响。方法采用D-氨基半乳糖 （D-GalN）+ 脂多糖（LPS）构建肝细胞损伤模型，实验设置对照组、模型组、空白血浆组、中药血浆组、3-MA组、中药 +3-MA 组。CCK-8法筛选含药血浆最佳干预浓度及时间;AnnexinV-APC/PI双染色法检测细胞凋亡情况;JC-1染色检测线粒体膜电位；MitoSOXRed染色检测活性氧（ROS）水平;生物化学法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平;透射电镜观察肝细胞超微结构;RT-qPCR法检测PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、螯合体 1（SQSTM1/P62）mRNA 水平;Westernblot法检测PINK1、Parkin、LC3、P62、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（ （Bax） 、裂解的胱天蛋白酶-3（cleaved-Cas-pase-3）和胱天蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平。（剩余19212字）