层状双氢氧化物负载si-NEAT1通过miR-133b/PD-L1轴调控乳腺癌紫杉醇耐药及巨噬细胞极化

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摘要：目的研究层状双氢氧化物（LDH）负载si-NEAT1对乳腺癌紫杉醇耐药及肿瘤相关巨噬细胞极化作用的分子机制。方法qRT-PCR、Westermbloting检测乳腺癌亲本细胞（SKBR3）和紫杉醇耐药乳腺癌细胞（SKBR3-PR）中LncRNANEAT1、miR-133b和PD-L1的表达;设置实验分组Control、si-NEAT1、miR-133b mimics，qRT-PCR、Westem bloting检测 SKBR3-PR中MRP、BCRP和PD-L1的表达，划痕、Transwell检测增殖迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡；采用si-NEAT1和miR-133b inhibitor进行Rescue实验；肿瘤细胞上清（CM）与巨噬细胞共培养，设置实验分组PBS、IL-4、PBS + SKBR3CM、PBS + SKBR3-PRCM、IL .4+ PR si-NCM，qRT-PCR检测M2型巨噬细胞标志物Arg-1、CD163、IL-10与miR-133b、PD-L1的表达，免疫荧光检测CD163与CD206;构建LDH@si-NEAT1纳米载体转染肿瘤细胞，设置分组Control、LDH、游离si-NEAT1、LDH@si-NEAT1，qRT-PCR、Westernbloting、免疫荧光检测MRP、BCRP和PD-L1的表达，划痕、Transwell实验检测细胞增殖迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡;LDH@si-NEAT1CM与巨噬细胞共培养，设置实验分组PBS、IL-4、IL-4+PR @ CM，qRT-PCR、免疫荧光检测Arg-1、CD163、IL-10及miR-133b和PD-L1的表达。（剩余22822字）