农作物中Cry1A(c)和CP4-EPSPS转基因成分双重实时荧光PCR检测方法的建立

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摘要：采用羧基荧光素（FAM）和六氯荧光素（HEX）荧光基团标记探针，建立针对农作物中常见抗虫和抗除草剂基因的双重实时荧光PCR检测方法，通过特异性、检出限以及模拟掺假试验验证此方法在转基因检测中的适用性。特异性检测试验中仅转基因作物（转基因棉花、转基因水稻、转基因大豆）和阳性质粒检测出相应转基因成分，其余样品均未出现明显PCR扩增曲线;检出限结果表明，双重实时荧光PCR方法对Cry1A（c）、CP4-EPSPS基因的检出限分别为1、0.1 ng，所建立的标准曲线r2值均大于0.98，具有对农作物中的转基因成分进行定量检测的能力;模拟掺假检测显示此方法可检测到1%的Cry1A（c）和5%的CP4-EPSPS转基因成分。（剩余7264字）