植物雌激素大豆黄酮对小鼠乳腺上皮细胞乳成分合成和细胞增殖的影响及机制

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摘 要: 本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000 μmol·L-1)处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度及时间;试验分为对照组(0 μmol·L-1 DZ处理)、低浓度组(10 μmol·L-1 DZ处理)、中浓度组(20 μmol·L-1 DZ处理)、高浓度组(40 μmol·L-1 DZ处理),并以生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,37 ℃、5%CO 2培养12 h后,进行如下试验:1)测定细胞及分泌上清中甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)含量及脂滴染色变化;2)检测细胞增殖与凋亡相关蛋白、乳成分合成相关蛋白的表达变化;3)检测PI3K/AKT-mTOR信号通路关键蛋白的磷酸化水平;4)流式细胞技术分析细胞凋亡率与细胞周期分布情况。(剩余21427字)