白藜芦醇通过PROX1/SIRT1信号通路调控山羊肌纤维类型转化的机制研究

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摘 要： 旨在解析白藜芦醇（resveratrol，RES）介导PROX1基因调控山羊骨骼肌肌纤维类型转化的分子机制。体内试验部分，试验选取12只180日龄去势努比亚山羊（（28.25±0.26）kg）随机分为2组，每组6个重复。以补饲0、150 mg·kg-1 RES组山羊背最长肌组织为试验样品，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及Western blot技术检测PROX1基因的表达量；体外试验，基于课题组前期试验所筛选出的20 μmol·L-1 RES是细胞培养最佳浓度，通过转染PROX1干扰片段及干扰片段与20 μmol·L-1 RES共处理山羊骨骼肌成肌细胞，检测CaN/NFAT通路关键基因与肌纤维四型标志基因在mRNA水平及蛋白水平的表达情况；同时，利用蛋白-蛋白对接技术检测SIRT1与PROX1蛋白是否互作，并通过SIRT1抑制剂EX-527和RES共处理山羊成肌细胞，验证SIRT1与CaN/NFAT通路的调控关系。（剩余14068字）