猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

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摘 要： 为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS-CoV）血清抗体的快速检测方法，本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因，纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a（+），构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后，采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原，以兔抗猪HRP- IgG作为二抗，利用方阵滴定法优化各反应条件，建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法，并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。（剩余16107字）