体外对牛冠状病毒复制具有抑制效应藏药的筛选

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摘 要：

本研究旨在筛选出对牛冠状病毒（BCoV）体外复制具有抑制效应的藏药。构建BCoV核衣壳（N）蛋白原核表达载体，诱导表达后将纯化的蛋白分别免疫小鼠和兔，获得鼠抗和兔抗N蛋白多克隆抗体，建立用于测定BCoV复制的Western blot和间接免疫荧光法（IFA）；水煎法获得21种候选藏药的水提物，CCK-8法测定水提物对人结直肠腺癌细胞（HCT-8）的最大安全浓度，以BCoV感染HCT-8细胞为研究对象，分别设置BCoV感染组、藏药水提物处理组、利巴韦林处理组，在BCoV感染24 h后分别应用实时荧光定量PCR、Western blot、IFA测定细胞中BCoV复制量，统计分析藏药水提物对病毒复制的抑制作用，筛选对BCoV具有显著抑制作用的藏药。（剩余18691字）