Neuritin野生型蛋白的制备及活性、稳定性的检测及分析

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摘要：目的 制备符合药典结构要求的无标签Neuritin野生型（wild type，WT）蛋白，并完成其存在形式、活性及稳定性鉴定及分析。方法 利用基因重组技术构建符合药典结构要求的Neuritin WT酵母重组子，利用SDS-PAGE还原电泳及Western blot对其进行高表达筛选及鉴定；摸索建立无标签Neuritin WT蛋白纯化方法，对纯化后的蛋白进行SDS-PAGE还原电泳分子量鉴定、Western blot免疫原性鉴定、SEC-HPLC精细鉴定及宿主DNA、宿主蛋白残留量检测；利用SDS-PAGE非还原电泳完成存在形式的鉴定；通过参照药典建立的重组Neuritin蛋白活性鉴定方法，检测并分析Neuritin WT纯化蛋白的活性，并观察37℃下不同时间Neuritin WT纯化蛋白的稳定性。（剩余14682字）