靶向c-Met的CAR-NK细胞免疫治疗胃癌的体外研究

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[摘要] 目的 探讨靶向细胞间质上皮转化因子（cellular-mesenchymal epithelial transition factor，c-Met）的嵌合抗原受体NK（chimeric antigen receptor-NK，CAR-NK）细胞在体外对胃癌细胞的抑制和杀伤作用。方法 采用流式细胞术（flow cytometry，FCM）、蛋白质免疫印迹法、反转录荧光定量聚合酶链反应检测胃癌细胞株（MKN-45、GTL-16和NCI-N87）和胃黏膜上皮细胞GES-1中c-Met的蛋白和核酸水平表达情况；通过细胞免疫荧光实验检测c-Met CAR对高表达c-Met的胃癌细胞株GTL-16的特异性识别作用；通过慢病毒载体构建靶向c-Met的CAR-NK细胞，并应用FCM检测CAR-NK细胞的感染效率和细胞表型；通过乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）实验和酶联免疫吸附试验检测c-Met CAR-NK细胞对胃癌细胞株和胃黏膜上皮细胞的杀伤效应。（剩余9228字）