赤水乌骨鸡ADSL基因的组织表达特征及其干扰载体构建

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摘要：【目的】探究赤水乌骨鸡胸肌组织中腺苷琥珀酸裂解酶基因（ADSL）表达特征及其目的基因的干扰载体构建，为深入研究畜禽组织肌肉中肌苷酸（IMP）的表达规律及ADSL基因影响畜禽风味的机制提供理论参考。【方法】以不同月龄（3、4、5和6月龄）的赤水乌骨鸡（公鸡和母鸡各半）为试验材料，运用实时荧光定量PCR检测不同月龄及不同性别赤水乌骨鸡胸肌组织中ADSL基因的表达情况；同时根据GenBank中鸡ADSL基因mRNA序列（NM_205529.2）设计4对短发夹RNA（shRNA）干扰序列（shl-ADSL、sh2-ADSL、sh3-ADSL和sh4-ADSL）和1对阴性对照序列（sh-NC）与pGPH1/GFP/Neo载体连接后进行测序，将构建成功的ADSL基因干扰载体转染至成肌细胞，检测并筛选出干扰效率最高的干扰载体。（剩余19809字）