miR-375-3p 靶向 Fam229a 调控猪前体脂肪细胞分化

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摘 要: 旨在探究 miR-375-3p 对猪脂肪细胞生成的调控作用及靶向 Fam229a 的作用机制。本研究选取了饲养在相同条件下的10 头 30 日龄的健康无病的公猪为研究对象,通过实时荧光定量PCR技术(qPCR)检测 miR-375-3p 在心脏、肝脏、脾脏等组织的表达分布及在脂肪细胞成脂诱导分化不同时期的表达水平;利用 miRNA mimic 和 miRNA inhibitor 过表达和干扰 miR-375-3p,qPCR 检测miR-375-3p对成脂关键基因CEBPα、PPARγ、FABP4表达的影响,油红O染色和统计分析检测成脂能力;通过生物信息学分析和双荧光素酶报告试验预测并鉴定miR-375-3p的下游靶标 Fam229a,并对 Fam229a 进行功能验证;最后利用 PSIPRED 软件、Phyre2.0 软件和 STRING 网站预测 Fam229a 下游功能及 qPCR 检测 Fam229a 对早期成脂关键基因 CEBPα、CEBPβ、ZFP423 和 ZFP521表达的影响;上述试验方法均设立3个生物学重复。(剩余21218字)

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