SGK3 在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用及其机制

打开文本图片集

［摘 要］ 目的：探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3（SGK3） 在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用，初步阐明SGK3在哺乳动物卵母细胞早期发育中的调控机制。方法：利用超排卵技术获取生发泡（GV） 期小鼠卵母细胞，利用显微注射技术将表达质粒体外转录获得的SGK3 mRNA注射至 GV 期卵母细胞， 分为对照组、Tris-EDTA 缓冲液（TE） 组和 SGK3 mRNA 组， 采用Western blotting 法检测各组小鼠卵母细胞中SGK3 蛋白表达水平， 显微注射SGK3 mRNA 后1、2、3 和4 h 观察并计算各组卵母细胞生发泡破裂（GVBD） 率，采用SGK3 抗体稀释抑制实验观察各组卵母细胞形态表现，采用Western blotting 法检测体外培养不同时间点卵母细胞中磷酸化SGK3 （pSer48）（SGK3-pSer48） 和磷酸化细胞分裂周期蛋白2 （CDC2）（pTyr15）（CDC2-pTyr15） 蛋白表达水平。（剩余14619字）