猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白纳米抗体的筛选及其对病毒复制的抑制效应

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摘 要： 为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）GP5蛋白的特异性纳米抗体，并探究其对病毒复制的抑制效应。使用原核表达系统将PRRSV-GP5蛋白大量表达后经镍柱亲和层析法纯化，使用所获的重组GP5蛋白免疫羊驼，并于第0、14、28、42 天时采血，检测羊驼体内抗体效价后分离全血淋巴细胞，提取细胞总RNA，反转录后使用巢式PCR扩增出重链抗体可变区（VHH）片段，并与pCANTAB-5E载体相连后转化入TG1感受态细胞，利用噬菌体展示技术构建GP5-VHH噬菌体抗体展示文库。（剩余19065字）