L-半胱氨酸对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素分泌的影响

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摘 要: 旨在探讨L -半胱氨酸(L-Cys)对体外培养绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)增殖、凋亡和类固醇分泌的影响。本研究采集1~1.5岁龄体重相近饲养条件相同的30只健康性成熟小尾寒羊母羊新鲜卵巢,从优势卵泡(2~8 mm)中收集GCs,随机分为 5 组,每组 6 个重复,各组添加L-Cys 浓度分别为0、100、300、500和700 μmol·L-1,培养48 h 后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测GCs的凋亡情况,采用 ELISA 检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平并采用实时荧光定量PCR和 Western blot 分析L-Cys对绵羊颗粒细胞增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB1)、凋亡相关基因(BAX、Caspase-3、Bcl-2)和类固醇分泌相关基因的(STAR、3β-HSD、CYP11A1、CYP19A1)mRNA和蛋白表达的影响。(剩余18443字)