2种检测兰花黄瓜花叶病毒方法的建立与比较

摘  要：黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus， CMV）是一种可侵染多种单、双子叶植物的病毒，宿主范围非常广泛。本研究针对兰花中黄瓜花叶病毒建立了2种高效检测技术：反转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和反转录环介导等温扩增（RT-LAMP）。RT-qPCR采用TaqMan探针法，根据外壳蛋白（coat protein， cp）基因保守序列设计引物及探针，cp克隆质粒为标准品建立标准曲线；RT-LAMP同样以cp基因保守区域为模板设计内、外引物；以CMV、建兰花叶病毒（Cymbidium mosaic virus， CymMV）、齿兰环斑病毒（Odontoglossum ringspot virus， ORSV）的病毒RNA为模板进行RT-qPCR及RT-LAMP特异性检测；以10倍梯度稀释的CMV RNA为模板进行灵敏性检测；使用2种方法对田间兰花样品进行CMV感染情况监测。（剩余18189字）