传染性法氏囊病病毒新型变异株VP2蛋白原核表达及免疫效果评价

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DOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2023.06.029

摘要：【目的】构建传染性法氏囊病病毒新型变异株（vaIBDV）VP2蛋白原核表达质粒，并明确VP2蛋白的免疫原性，为vaIBDV亚单位疫苗的开发提供技术支持。【方法】从IBDV新型变异株（BZ）中扩增VP2基因片段，亚克隆至pET-28a（+）载体上构建重组原核表达质粒，并转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，以IPTG诱导表达后通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定，并以vaIBDV阳性血清进行琼扩效价测定；经Ni-NTA亲和层析纯化及适当浓缩后，制备乳化疫苗并免疫21日龄SPF鸡，通过安全性检验、抗体效价测定及攻毒保护评价进一步验证融合蛋白VP2的免疫原性。（剩余21698字）