薯蓣皂苷元通过上调胃癌EMT抑制肽表达抑制胃癌细胞的增殖和侵袭

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［摘要］  目的： 探讨薯蓣皂苷元（Diosgenin）对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及潜在的机制。方法： 选择胃癌MKN-28和BGC-823细胞，分为对照组（常规培养）、溶媒组（培养基中加入与薯蓣皂苷元组等体积的乙醇）和薯蓣皂苷元组（培养基中分别加入终浓度为0.5、2和8 μg/mL薯蓣皂苷元），采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组细胞胃癌EMT抑制肽（inhibitory gastric cancer EMT-related peptide，IGCE）相对表达量；另将胃癌细胞分为对照组（常规培养）、Lv-control组（培养基中加入重组慢病毒Lv-control）、Lv-IGCE组（培养基中加入重组慢病毒Lv-IGCE），病毒感染72 h，采用CCK-8检测细胞增殖活性，Trans-well法检测细胞侵袭能力；再将胃癌MKN-28和BGC-823细胞分为对照组（常规培养）、转染组（细胞转染pcDNA-IGCE-aa-GFP），转染48 h，显微镜下观察绿色荧光蛋白（GFP）表达；选用pcDNA-IGCE-aa-GFP转染后的MKN-28细胞分为对照组（常规培养）、溶媒组（培养基中加入与薯蓣皂苷元组等体积的乙醇）、不同浓度薯蓣皂苷元组（培养基中分别加入终浓度为0.5、2和8 μg/mL薯蓣皂苷元），共孵育48 h，采用蛋白印迹检测融合蛋白IGCE-aa-GFP表达；将胃癌MKN-28细胞分为对照组（常规培养）、Lv-IGCE-smORF组（培养基中加入慢病毒Lv-IGCE-smORF），病毒感染48 h，再经放线菌酮处理不同时间，分别于0、0.5、1、2、4和8 h采用蛋白免疫印迹检测Krüppel样因子4（KLF4）蛋白表达。（剩余15880字）