Tollip敲除猪肾细胞系的构建

打开文本图片集

摘 要：旨在探究Toll作用蛋白（toll-interacting protein，Tollip）对口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）增殖的影响，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系（porcine kidney cell line，PK-15），并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果，然后利用CCK-8试剂盒测定Tollip缺失后细胞活力变化，确认敲除细胞与野生细胞无显著差异，用FMDV感染敲除细胞后，采用Western blot、间接免疫荧光、实时荧光定量和病毒滴度测定等方法测定病毒在敲除细胞系中复制情况。（剩余16575字）