基于CRISPR/Cas9技术的SS18-SSX1阳性细胞模型的构建与验证

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摘要：目的 利用CRISPR/Cas9技术构建并验证SS18-SSX1+-HEK293T细胞模型。方法 靶向SS18和SSX1分别设计sgRNA，构建Lentivirus-CRISPR v2-SS18-gRNA-SSX1-gRNA-EGFP一体化慢病毒载体，通过慢病毒转染和荧光流式分选技术筛选转入载体的HEK293T多克隆细胞，在多克隆细胞的基础上挑选SS18-SSX1阳性的单克隆细胞株，通过RT-PCR、Sanger测序和Western Blot验证SS18-SSX1+-HEK293T单克隆细胞系构建成功。（剩余14310字）