低剂量甲氨蝶呤联合索拉非尼对小鼠骨肉瘤移植瘤的影响及其机制

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［摘 要］ 目的：探讨低剂量甲氨蝶呤 （MTX） 联合索拉非尼 （SFN） 对人骨肉瘤 （OS） 的抗肿瘤作用，并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养4种人OS细胞 （143B细胞、HOS细胞、U2OS细胞和MG63 细胞），采用Western blotting 法测定各种细胞中的血管内皮生长因子（VEGF） 和血管内皮细胞生长因子受体2 （VEGFR2） 蛋白表达水平；建立人OS 裸鼠皮下移植瘤模型，并将建模成功的20 只BABL/C 裸鼠随机分为对照组（给予2% 二甲基亚砜+98% 玉米油）、低剂量MTX 组（给予2 mg·kg-1 MTX）、SFN 组（给予15 mg·kg-1 SFN） 和联合用药组（给予2 mg·kg-1 MTX+ 15 mg·kg-1SFN），每组5 只，测量各组小鼠肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线；HE 染色观察4 组小鼠肿瘤组织病理形态表现，免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中VEGFR2、细胞增殖抗原Ki-67 和缺氧诱导因子1（HIF-1） 蛋白阳性表达率； 人OS 143B 细胞分别给予0、0. 125、0. 250、0. 500、1. 000、2. 000 和4. 000 μmol·L-1 MTX 处理，CCK-8 法检测各组143B 细胞存活率，计算半数抑制浓度（IC50），并选取对143B 细胞存活无影响的MTX 浓度作为低剂量MTX；人OS 143B 细胞分为对照组和低剂量MTX 组（给予0 和0. 250 μmol·L-1 MTX 处理）， 酶联免疫吸附试验（ELISA） 法检测各组143B 细胞中VEGF水平。（剩余11365字）