橡胶树棒孢霉落叶病菌酵母单杂交cDNA文库及CcCas5启动子诱饵载体的构建

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摘要为了筛选出与CcCas5启动子结合的转录因子，本研究构建了橡胶树棒孢霉落叶病菌的酵母单杂交cDNA表达文库和CcCas5启动子诱饵载体， 并对3-氨基-1，2，4-三唑 （3-amino-1，2，4-triazole，3-AT）的最佳抑制浓度进行了筛选。结果显示，构建的酵母单杂交cDNA表达文库总容量为3.49×106 cfu，插入片段主要分布于750～2 000 bp之间，重组率为95.8%;克隆了CcCas5基因2 600 bp的启动子序列，预测获得真菌主要的10大类转录因子的结合位点165个;构建了分别携带1 500 bp和1 000 bp启动子序列的酵母单杂交启动子诱饵载体，10 mmol/L的3-AT能抑制pHis2.1-pCcCas5-1000和pHis2.1-pCcCas5-1500的背景表达。（剩余14863字）