白细胞介素22对肝星状细胞活化的影响及其机制

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摘要:目的探讨肝星状细胞活化过程中白细胞介素(IL)22发挥的作用及影响机制。方法选取人肝星状细胞系LX-2细胞为研究对象,以转化生长因子(TGF)β1诱导LX-2细胞构建肝星状细胞活化模型,以梯度浓度的IL-22处理LX-2细胞,通过Western Blot、qRT-PCR检测活化标志物Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平以确定适宜的药物工作浓度、时间;通过Western Blot、qRT-PCR及免疫荧光方法检测经IL-22处理的活化肝星状细胞中成纤维细胞因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)、内质网应激(ERS)及其活化标志物水平;以衣霉素(TM)诱导LX-2细胞ERS,通过Western Blot、qRT-PCR检测经IL-22处理后LX-2细胞ERS及其活化标志物水平;使用肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导剂(TWEAK)、小干扰RNA分别上/下调Fn14,再检测磷酸化肌醇需求蛋白1α(p-IRE1α)、肌醇需求蛋白1α(IRE1α)、转录因子剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)、COL1A1和α-SMA基因及蛋白水平;在IL-22处理TGF-β1诱导的LX-2细胞的基础上加用TWEAK上调Fn14,通过Western Blot、免疫荧光方法检测Fn14、ERS及其活化标志物水平。(剩余16885字)