斑马鱼zgc113227多克隆抗体及卵形鲳EVM0008813多肽抗体的制备

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摘要：【目的】制备斑马鱼zgc113227多克隆抗体和卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体，为后续深入研究斑马鱼zgc113227基因和卵形鲳鲹EVM0008813基因的功能特性提供重要工具。【方法】以卵形鲳鲹EVM0008813基因为查询序列，通过BLASTp搜索获得斑马鱼同源基因zgc113227（NP_001014341），以同源重组方式构建原核表达载体并转化大肠杆菌B21感受态细胞进行诱导表达，再以诱导表达获得的融合蛋白为抗原免疫日本大耳兔制备多克隆抗体，采用间接ELISA检测抗体效价，然后通过Western blotting鉴定及SDS-PAGE检测zgc113227多克隆抗体特异性，并以高效液相色谱—质谱联用（HPLC-MS）纯化鉴定EVM0008813多肽抗体。（剩余21435字）