巴戟天多糖通过靶向IncRNAXIST调控糖酵解-焦亡延缓小鼠骨关节炎软骨细胞退变

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摘要：目的探讨巴戟天多糖（MOP）延缓骨关节炎（OA）软骨细胞退变的作用机制。方法提取4周龄C57BL/6小鼠软骨细胞，经纯化培养、鉴定后，采用白介素-1β（IL-1β）诱导软骨细胞退变模型，随机将细胞分为对照组、IL-1β、MOP-L（1、2、4、6、8、10 mg/mL）组，通过CCK-8法筛选MOP最佳干预条件；Westernbloting检测MOP不同剂量对丙酮酸激酶M2（PKM2）、半胱天冬酶1（caspase-1）和消皮素D（GSDMD）的蛋白表达;采用荧光原位杂交技术（FISH）法观察各组软骨细胞中IncRNAXIST的表达；对IncRNAXIST进行过表达与敲减，随机将细胞分为Control、IL-1β、IL- ⋅1β+ MOP、IL-1β+oe/sh-XIST、IL-1β+oe/sh-XIST+MOP组，采用real-timePCR检测各组软骨细胞糖酵解调控因子葡萄糖转运体1（GLUT1）、已糖激酶2（HK2）、PKM2、乳酸脱氢酶A（LDHA）、6磷酸果糖2激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（PFKFB3），焦亡调控因子核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3（NLRP3）、caspase-1、GSDMD的mRNA水平；流式细胞术观察各组软骨细胞的凋亡率；甲苯胺蓝染色观察各组软骨细胞糖胺聚糖表达情况；Westemblotting检测各组软骨细胞糖酵解和焦亡调控因子蛋白表达。（剩余16124字）