CircACAP2靶向miR-29a-3p/CCNT2轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响

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摘要目的：探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2（CCNT2）轴对缺氧/复氧（H/R）诱导的心肌细胞损伤的影响。方法：将H9c2细胞分为Control组（正常培养）、si-NC组（转染si-NC）、Model组（建立H/R模型）、si-CircACAP2组（转染si-CircACAP2）、si-CircACAP2＋inhibitor-NC组（si-CircACAP2和inhibitor-NC共转染）、si-CircACAP2＋miR-29a-3p inhibitor组（si-CircACAP2和miR-29a-3p inhibitor共转染）；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测H9c2细胞中CircACAP2、miR-29a-3p的表达水平；四唑盐（MTT）法检测H9c2细胞活力；流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡；单丹磺酰尸胺（MDC）染色法检测H9c2细胞自噬；乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒检测H9c2细胞上清中LDH、MDA、SOD水平，DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧（ROS）水平；蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞凋亡蛋白［B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）］、自噬相关蛋白（Beclin-1、P62）及CCNT2的表达；双荧光素酶报告检测CircACAP2对miR-29a-3p的靶向关系和miR-29a-3p对CCNT2的靶向关系。（剩余15535字）