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基于甲基化捕获联合转录组测序探讨栀子-川芎药对抗动脉粥样硬化的作用机制


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摘要目的:觀察栀子-川芎药对对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7泡沫细胞DNA甲基化和转录组表达的作用。方法:细胞毒性试验(CCK-8)法检测不同浓度栀子-川芎冻干粉对RAW 264.7细胞的增殖抑制情况;以ox-LDL处理RAW 264.7细胞48 h形成泡沫细胞,将细胞分为栀子-川芎冻干粉组(80 mg/L ox-LDL、0.3 g/L 栀子-川芎冻干粉干预)、模型组(80 mg/L ox-LDL处理)和空白对照组(未处理);气相、色谱质谱法(GC-MS)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测各组总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)以及炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)]的表达;采用DNA甲基化捕获测序(MC-seq)和转录组测序(RNA-seq)方法检测各组细胞全基因组DNA甲基化和转录组基因表达水平,使用DSS工具分析各组样本间的差异甲基化位点(DMS)和差异表达基因(DEGs),并利用生物信息学方法对差异基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)富集分析。(剩余15411字)

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