葱潜隐病毒吉林分离物的鉴定及ELISA检测方法的建立

摘要

葱潜隐病毒（shallot latent virus，SLV）是影响葱、蒜产量和品质的主要病毒之一，本研究从吉林省珠葱中分离并鉴定了3株SLV，分离物衣壳蛋白（coat protein， CP）的基因序列与已报道的SLV分离物的相似性为78.84%～83.24%;通过原核表达并纯化病毒CP蛋白，免疫小鼠，制备了多抗血清，效价达256 000倍;以纯化的多抗血清为基础建立了SLV的间接ELISA检测方法，优化了反应条件：确定待测样品包被条件为4℃过夜，封闭条件为5%脱脂奶37℃ 60 min，检测抗体工作浓度125 ng/mL 37℃孵育1 h，酶标抗体工作浓度500 ng/mL 37℃孵育1 h。（剩余8225字）