基于TaqMan MGB探针的可可花瘿病菌快速检测方法

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摘要 可可花瘿病菌是一种我国进境植物检疫性真菌。本文根据可可花瘿病菌EF1α基因的保守序列，设计并合成1对特异性的实时荧光PCR引物和1条TaqMan MGB探针，建立了可可花瘿病菌的实时荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明，该检测方法能够特异性检出可可花瘿病菌;实时荧光PCR优化反应条件为引物终浓度0.2 μmol/L，探针终浓度0.6 μmol/L;灵敏度试验结果表明，20 μL反应体系中可可花瘿病菌DNA含量最低检测限为10 pg;重复性试验结果表明，该检测方法的重复性和稳定性良好;接种试验样品检测结果表明，该方法可用于疑似携带可可花瘿病菌样品的检测与初筛。（剩余10197字）