胸腺素β4在RAW264.7巨噬细胞炎症模型中的抗炎作用机制

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【摘要】 目的 探讨胸腺素β4(Tβ4)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核-巨噬细胞RAW264. 7极化趋向,以及其对炎症反应的影响。方法 用LPS诱导RAW264.7细胞建立炎症模型。采用CCK-8法检测细胞活力,酶联免疫吸附法检测细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)]的质量浓度;Griess法检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)的分泌情况;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测核因子-κB(NF-κB)、环氧酶-2(COX-2)、
TNF-α、IL-6 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、NF-κB、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)和磷酸化IκBα(p-IκB-α)蛋白水平;荧光染色双标法观察巨噬细胞的极化状态;免疫荧光染色检测NF-κB定位及表达。(剩余16720字)