谷子糖基转移酶基因SiDDOST的克隆及表达载体的构建

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摘 要:为探究谷子糖基转移酶基因的生物学功能及调控作用,以谷子为材料,利用RT-PCR技术从谷子农家品种毛毛亮扩增获得1 338 bp包含完整编码区的糖基转移酶基因(SiDDOST)cDNA序列,并通过生物信息学方法分析SiDDOST全长序列的特征,利用限制性内切酶NcoⅠ和PmlⅠ,分别将目的基因片段与植物过表达载体pCAMBIA3301双酶切,然后切胶回收基因片段和载体片段,通过T4 DNA连接酶将糖基转移酶基因片段与过表达载体pCAMBIA3301连接,重组表达载体转化大肠杆菌DH5α,经重组表达载体与空载体电泳检测、菌液PCR、双酶切分析验证。(剩余10663字)