基于OPG/RANK/RANKL信号通路探究益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化的影响

〔摘要〕 目的 探讨益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs）成骨分化的影响及其作用机制。方法 给予大鼠分别灌胃益肾健骨颗粒、生理盐水1周，制备含药血清及正常血清。采用背侧双切口切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松模型，分离并培养大鼠BMSCs，流式细胞术鉴定BMSCs，将BMSCs细胞随机分为对照组（N组）、含药血清组（J组）、含药血清+si-NC组（J+C组）、含药血清+si-OPG组（J+O组），按组进行相应处理，对各组BMSCs进行诱导成骨分化，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）染色与茜素红S染色法检测ALP活性及矿化结节数，实时荧光定量PCR（real-time PCR，RT-qPCR）检测ALP、Runt相关转录因子2（Runt-associated transcription factor 2， Runx2）、骨钙素（osteocalcin， OCN）mRNA表达，Western blot检测骨保护素（osteoprotegerin， OPG）、核因子κB受体活化因子（receptor activator of nuclear factor kappa B， RANK）、RANK配体（RANK ligand， RANKL）蛋白表达。（剩余12478字）