不同苹果品种抗苹果绵蚜的漆酶基因表达模式及其原核表达载体筛选

打开文本图片集
摘要:【目的】明确不同苹果品种漆酶基因在抗苹果绵蚜过程中的差异表达模式,探索原核表达苹果漆酶蛋白的方法与条件。【方法】基于转录组测序分析抗蚜品种新红星(Starkrimson)、小国光(Ralls Genet)与感蚜品种红富士(Red Fuji)3个苹果品种被苹果绵蚜为害0 h、12 h、5 d 后漆酶基因的表达模式,筛选抗蚜候选漆酶基因;选择pET-28a(+)、pET-32a(+)、pGEX-TEV、pHAT2 4 种载体,对4 个漆酶基因MdLac23、MdLac6、MdLac7、MdLac2 进行原核表达,对表达产物进行Western-Blot 验证,镍柱亲和层析纯化,以ABTS为底物分析其酶活性。(剩余16900字)