[摘要]目的:探讨电针对缺血性脑卒中的作用机制。方法:线栓法制备Wistar大鼠局灶脑缺血再灌注模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、电针组。选取双侧“合谷”穴为电针穴位,采用原位杂交法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,免疫组化法检测血管生成素(Ang-1)和内皮抑素(Endostatin)蛋白的表达。结果:模型组VEGF mRNA、Ang-1蛋白、Endostatin蛋白的表达较正常组增加(P1=40 Hz,F2=60 Hz,空载输出电压1.5 V。
1.4取材
每组动物到达相对应时相点时,大鼠麻醉后用生理盐水200 mL快速左心室灌注冲洗,再用4%多聚甲醛(加0.1%的DEPC)500 mL先快后慢灌注固定,断头取脑,制备石蜡切片,以缺血区周围为观察部位,取相邻切片分别用于原位杂交、免疫组化检测。
1.5 VEGF mRNA原位杂交检测
采用VEGF mRNA原位杂交试剂盒(武汉博士德公司)。杂交前处理:切片脱蜡至水,3%柠檬酸一胃蛋白酶液处理切片3 min,1%多聚甲醛(pH7.4的0.1 mol/L PBS配制,加0.1%的DEPC)后固定。(剩余677字)