许 勇 吴小涛 陈晓钢
[摘要]目的探讨颈椎后纵韧带胶原和蛋白多糖含量变化在颈椎病发病机制中的意义。方法收集脊髓型颈椎病患者下位颈椎后纵韧带15份作病例组,同年龄段正常下位颈椎后纵韧带10份作对照组。Weossner法测定两组总胶原含量,酶联免疫吸附法测定Ⅱ型胶原含量,间苯三酚分光光度法测定蛋白多糖含量的变化。Masson染色后对比观察后纵韧带的显微结构变化特点。结果 病例组总胶原和蛋白多糖含量均低于对照组,Ⅱ型胶原含量较对照组高,差异均有统计学意义(P-1)在110度分解24h;旋转蒸发器去除盐酸,双蒸水溶解残留物;加氯胺T溶液室温静置20min,加过氯酸溶液室温静置5min,加对苯胺基苯甲醛溶液置60度温箱20min,取出待冷却;在波长560nm处测定吸光值,通过羟脯氨酸标准曲线计算出待测液内的羟脯氨酸浓度,以此推算组织总胶原蛋白含量。
1.4 Ⅱ型胶原含量的测定
标本称重,脱水、脱脂,0.4mol·L-1乙酸浸泡过夜,在冰浴下制备成匀浆,以盐析法提取胶原。ELISA法测定Ⅱ型胶原,按试剂盒说明书的步骤进行,在波长450nm下测定Ⅱ型胶原的浓度,计算含量。(剩余1895字)